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第四节 抗体筛查试验(第1页)

第四节抗体筛查试验

一、目的和原则

对受血者的血清或血浆,应常规做抗体筛选试验,以发现有临床意义的不规则抗体。同时,对供血者的血清也要做抗体筛查试验,以确保供血者的不规则抗体不能进入受血者体内,使受血者输入体内的血液安全有效。不规则抗体是指抗A、抗B以外的抗体。

抗体筛选的原则是让受检者的血清与特殊的试剂红细胞起反应以发现如某种特异性抗体曾引起过新生儿溶血病,明显的溶血性输血反应或输入体内的红细胞寿命缩短等临床有意义的抗体。这种抗体在37反应最敏感。用于检查这种抗体的方法有盐水法、酶法、低离子强度介质法、抗人球蛋白法、微柱凝胶卡法等。总之,要根据抗体的血清学行为及情况选择检测方法。

二、抗筛试剂红细胞

抗体筛查所用试剂细胞是特定的O型红细胞。这些O型红细胞已商品化而易获得。通常是2或3个人份的O型红细胞成为1套试剂,每套含有单一供血者的红细胞或取自2个供血者的等量的红细胞混合。混合细胞只用于检查供血者血清标本。单一的红细胞常用于检查受血者的血清标本,因其敏感性较高,每套试剂筛选红细胞中必须有下列抗原D、C、E、、S、s、P1、Lea、Leb、K、k、Fyb、Fya、JKa、JKb。有条件的实验室还可备用Lua、Cw、KPa、Jsa等抗原。商品化的试剂红细胞是悬液浮于保存液中,暂不用时,可冷冻保存。

工作量不大的实验室,可将购买的商品试剂红细胞,用V形小塑料瓶分成适合需要的量,再次分装,密封冷冻保存,用时取1小份即可,以减少浪费。加冷冻液试剂红细胞通常可以保存9周。过期的试剂红细胞因抗原强度下降而不应使用。

加有ACD或CPD保养液抗凝筛查红细胞,一般在4可保存21天。加入CPD-A-1的保养液的抗凝筛查红细胞,效果更佳,能保存35天。

三、抗体检测试验的鉴定技术

抗体筛选试验不一定能检出所有有临床意义的抗体,一些抗低频率抗原的抗体或有剂量效应的抗体,易补漏检。如临床意义的抗体表达出剂量效应的RH和KIDD血型系统的抗体,试验时一定要引起足够的重视此时要选用抗原性更完全和特异性更强筛选细胞做试验,或选用微柱凝胶技术做检查,因该技术敏感性比其他试验的敏感性更高,是目前抗筛选试验最理想的方法。

抗筛选试验应具备以下条件:

1.自身细胞检查。对受检者的血清与自身红细胞反应的情况要认真观察,以便证实血清内是否有自身抗体,或自身抗体与同种抗体二者共存。

2.用多种抗体检测技术,以及使用试验红细胞中的谱细胞(),检测受检者的血清以确定其抗体的特异性。

试剂谱细胞一般是由8-16个人的已知血型表现型的O型红细胞配套组成,具有各种不同的抗原成分根据谱细胞的反应格局一般可以鉴定常见的抗体。不同的特异性抗体要选用相应的谱细胞进行试验。

为了保证抗体鉴定的正确性,要求每个抗原要有足够的阳性和阴性细胞。同时,必须灵活运用盐水试验法、抗人球蛋白法、酶法,再结合吸收、放散等血清学特殊试验,从而获得客观真实抗体的结果。

要对谱细胞反应结果有正确的解释必须首先对一些特异性抗体的血清学特性进行了解,在分析反应结果,确定抗体特异性时可综合运用下列资料:

(1)观察受检血清与每个试剂谱细胞的反应结果。

(2)观察受检血清与其自身细胞的反应结果。

(3)观察受检血清与酶处理细胞的反应结果。

(4)观察反应格局,检查各个反应格局的结果,包括不同的温度、悬浮介质或酶作用的情况,一些抗体的特异性与反应相直接相关。

(5)是否有溶血现象。

(6)在阳性反应的细胞中,反应强度是否不同,是否出现课题效应。

(7)对自身红细胞上的抗原详细检查,从所缺少的抗原情况,提示是否存在相应的抗体。

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